以牛乳中的乳糖为原料，经β-半乳糖苷酶催化水解半乳糖苷键，生成半乳糖和葡萄糖，并通过转半乳糖苷的作用，将水解下来的半乳糖苷转移到乳糖分子，生成低聚半乳糖。

低聚果糖FOS等低聚糖则只可被乳酸杆A菌利用，对双歧杆B菌则不明显。

产品作用：
在自然界中，动物的乳汁中存在微量的低聚半乳糖，母乳中含量稍多。低聚半乳糖甜味比较纯正，热值较低（7.1J/g），甜度为蔗糖的20%～40%，保湿性极强。在pH为中性条件下有较高的热稳定性，100℃下加热1h或120℃下加热30min后，低聚半乳糖无任何分化。低聚半乳糖同蛋白质共热会发生美拉德反应，可以用于特殊性质的食物如面包、糕点等的加工

低聚半乳糖具有较强的耐酸性、耐热性，不会因为在加工过程中的高温杀菌而失去其本来应有之特性，而低聚果糖则不具备这些特性。